尊龙凯时为您介绍几种微生物培养与保存的方法,这些方法各具特色,适合不同用途与需求。
1️⃣ 传代培养法
传代培养法非常适合新手使用,它就像为微生物提供了一个“集体宿舍”。这种方法通过将微生物接种在斜面或穿刺管中,并放置在4℃冷藏,可以方便地随时取用,同时也能观察其菌落形态。
优点在于使用方便,随取随用;但缺点是霉菌和放线菌约2-4个月就需要搬迁,而细菌每月都需“换房”,频繁的传代可能导致变异,真可谓是“菌界996”。因此,适合短期项目,不推荐长期保存微生物。
2️⃣ 液体石蜡法
液体石蜡法堪称懒人福音。微生物生长良好后,将其倒入灭菌石蜡中,确保液面高出斜面1厘米,形成隔绝空气和水分的环境。霉菌和芽孢菌可以“冬眠”超过2年,酵母也能存活1年。
不过,它占据较大空间,并且取用时石蜡可能会飞溅,建议佩戴护目镜。这一方法特别适合实验室的“囤菌大户”,用于保存常规菌株。
3️⃣ 载体保藏法
载体保藏法非常适合喜欢干燥条件的人士。通过将微生物混合在沙土或滤纸小条中,真空抽干后用火封管,可以让细菌和酵母“休眠”2年,真菌甚至可存活17年。
滤纸法操作简单,剪下滤纸吸饱菌悬液后经过干燥,再放入安瓿管中。但需注意,孢子菌适用此法,营养细胞则不推荐使用。
4️⃣ 寄主保藏法
寄主保藏法是专为病毒等微生物提供的“VIP通道”。这类微生物,如病毒和立克次体,仅能在活细胞中进行传代。例如,流感病毒需要依赖鸡胚维持生命。尽管操作繁琐且成本高,但往往是唯一选择。
此方法适合“高冷”的微生物,一般细菌不适合这一方式。
5️⃣ 冷冻保藏法
在微生物冷冻保藏中,温度越低越安心。-20℃冰箱适合短期保存,芽孢菌可存活1年;-80℃冰柜可以将微生物冷冻至“暂时停滞”,即使是无芽孢菌也能存活2年;而液氮罐-196℃则适合长期保存“娇气包”如支原体和衣原体。
在冷冻之前,务必添加甘油或DMSO作为“防冻液”,以避免冰晶对微生物细胞造成损害。
6️⃣ 冷冻干燥法
冷冻干燥法被誉为冻干界的“时间胶囊”,适合长时间保存珍贵菌株。将微生物悬液与脱脂牛奶混合后,先在-70℃下速冻,再进行真空干燥,最后熔封成迷你“胶囊”。细菌和酵母可以“待机”超过10年,其中酵母甚至能够存活17年。
尽管这项技术设备昂贵、流程复杂,但对于保存“传家宝”级别的菌株来说,十分值得投资。
🚀 小贴士
选择合适的保存方法时,短期用菌可以考虑传代或石蜡法;而长期囤菌建议使用液氮或冻干法;若是处理孢子菌,则可选择沙土或滤纸法;病毒则需依赖寄主保持活性。
总之,借助尊龙凯时的先进技术和方法,您可以有效管理和保存各种微生物资源,提升生物医疗研究的效率。